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拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介

拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
Ntn4檢測試劑盒這樣可以減少到達(dá)平衡的時(shí)刻,也可以防止符合實(shí)驗(yàn)溫度的孵育時(shí)刻不可

更新時(shí)間:2021-03-14
訪問次數(shù):589
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Lassa Fever Virus(LASV)RTPCR

 貨號(hào)

 LZP6912

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
葫蘆素IIA 58546-34-2 價(jià)格Anti-TEAD3 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 通道蛋白 細(xì)胞膜蛋白

絡(luò)石苷33464-71-0*Anti-TEF Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 表觀遺傳學(xué)

人參皂甙Rk3 364779-15-7實(shí)驗(yàn)步驟Anti-TECR Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 脂蛋白 新陳代謝

原兒茶醛139-85-5 實(shí)驗(yàn)方Anti-TESK2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

羅漢果黃素156980-60-8價(jià)格Anti-TF2E2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 新陳代謝

三七皂苷R2(S型)80418-25-3?實(shí)驗(yàn)方法Anti-TESK2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

4-羥基異亮氨酸781658-23-9實(shí)驗(yàn)方法Anti-TFAP2A Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 新陳代謝 跨膜蛋白

莰非醇-3-O-蕓香糖苷17650-84-9實(shí)驗(yàn)方法Anti-TF2H2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

L-賴氨酸保存Anti-TFDP2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞類型標(biāo)志物

N-苯甲酰-L-酪氨酰乙酯價(jià)格Anti-TFE3 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺保存Anti-TFG Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 糖蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物

BOC-D-纈氨酸使用說明書Anti-TGFB1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素 內(nèi)分泌病

辛基磺基甜菜堿價(jià)格Anti-TGFB1I1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

馬脾〖鐵〗蛋白保存Anti-TGFB2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞分化

SP葡聚糖凝膠C-50保存Anti-TGFBR3 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物

無菌青霉素溶液Mouse Anti-YERSINIA PESTIS Moclonal Antibody  肉桂

MS 培養(yǎng)基 Murashige & Skoog Mediumanti-XIAP  瑞香素

anti-XAF1  人參皂苷RC

MS 培養(yǎng)基(1/2 蔗糖) Murashige & Skoog Medium (1/2 Sucrose)Anti-XRCC1  人參皂苷RD

Anti-ZCWCC1  人參皂苷Rg3

MS 培養(yǎng)基(1/2 蔗糖、不含瓊脂) Murashige & Skoog Medium Without Agar (1/2 Sucrose)Anti-Z-DEVD-FMK  20(s)-人參皂苷Rg

Anti-ZNF268 - middle   人參皂苷Rb1

培養(yǎng)基Anti-ZNF268 - N-terminal  Anti-ZNF268 - N-terminal   標(biāo)準(zhǔn)品

1/2MS 培養(yǎng)基Anti-ZNF300 - middle人參皂苷Rb2

anti-ZO-1人參皂苷Rb3
拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:HC1000u

大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:HC5000u

大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量: 保存-20℃5克

大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2500U

大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:

大鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500U

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TEL:021-61210612

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