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產(chǎn)品中心

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同斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介

同斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:
CDK-7檢測試劑盒微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):865
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱

 同斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Penaeus Monodontype Baculovirus(MBV,WSSV)PCR

 貨號

 LZP7120

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
4-Nitrophenyl α-D-manpyraside四溴鈀酸 Pd ≥20.5%亞鐵化鈉 CP

ADPG銠粉 99.99% metals basis原甲酸*酯 98%

RuDP氧化銠,合 銠 55%原甲酸三乙酯 99%

Acarbose氯亞鉑酸鈉 Pt 44.5%氟化銨 AR,98%

Methyl β-D-glucopyraside四氯鈀酸鈉  98%氟化銨 GR,98%

D-(+)-Sorbose六氯代鉑酸鈉六合物 Pt 34.0%氟化氫銨 AR,98.5%       

Moacetone glucose氯金酸鈉 金含量,48%  AR,40.0%

Kuromanin chloride硫酸銠溶液 80g(Rh)/L溶液氟酸 AR,40.0%

2-(Chloromethyl)-4-(4-nitrophenyl)-1,3-thiazole四氨合氯化鉑 合物 98%氟酸 CP,40.0%

2-Deoxy-L-ribose四(三苯基膦)鉑 Pt 15.2%氟酸 49.5-50.5%溶液

L-(−)-Glucose乙酸戊酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)氨基胍碳酸氫鹽 98.5%

Chlorophyllin乙酸戊酯 AR,99.00%三氧化二銻 99.99% metals basis

Chlorophyll乙酸戊酯 CP,98.5% 三氧化二銻 AR,99.5%

Chlorophyll B茴香 98%重去甲腎上腺素 ≥98%(HPLC),USP

Chlorophyll A乙縮 CP,97%L-去甲腎上腺素 98%

Crystal violet乙縮 Standard for GC,>99%(GC)辛弗林 98%

納他霉素(標準品)Drebrin A AntibodyRIAM/APBB1 interacting protein 1  β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體

硝苯地平Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)rHPV  重組人瘤病毒抗體

硝苯地平(標準品)TPX2 (D2R5C) XP® Rabbit mAbRHOBTB1  Rho相關結構域BTB蛋白質1抗體

尼莫地平Skp1 (D3J4N) Rabbit mAbRhoA  RhoA抗體

尼莫地平(標準品)Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) (D10B11) Rabbit mAbRho C  RhoC抗體

硝唑尼特CPT1A (D3B3) Rabbit mAbrhIL-18  重組人白細胞介素18抗體

硝唑尼特(標準品)Plectin-1 (D6A11) Rabbit mAbRHEB  Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體

寡霉素ALamin B2 (D8P3U) Rabbit mAbRHCG  RH血型C糖蛋白抗體

鹽酸奧洛他定SignalSilence® c-Raf siRNA IRHCE  Rh血型C抗原抗體

鹽酸奧洛他定(標準品)E2A (D2B1) Rabbit mAbRHBDD3  垂體瘤細胞凋亡抗體
同斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格人抗內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人抗組織轉谷氨酰酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫升

人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光10克

人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2000u

人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10KU

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