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當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  ELISA試劑盒  -  免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒  -  48T/96ThnRNP K異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒

hnRNP K異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

hnRNP K異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:phospho-c-Raf (Ser289) /FITC 熒光標(biāo)記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser259)/FITC 熒光標(biāo)記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser296) /FITC 熒光標(biāo)記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser

更新時(shí)間:2022-05-26
訪問次數(shù):932
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2)血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

5)培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

6)組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

hnRNP K異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒

英文名稱

hnRNP K ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格

48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)

LZ-E028693


QQ截圖20200429162339.jpg

檢測(cè)程序:

1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

標(biāo)本要求:

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

需要而未提供的試劑和器材:

1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等。

備試劑與收集血樣:

1.  收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒beta-香樹精鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品,水質(zhì)分析 三乙三氫氟鹽  97%

血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒β-胸鋅 CP,99%疊氮化四丁銨  95%

血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒Beta-育亨賓鋅粉 AR,99%十二烷硫鈉 CP

纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒Corylifol A鋅 AR,99%十二烷硫鈉 Ph. Eur,USP級(jí),92%

纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒D(+)-阿拉伯糖鋅粉 SP十二烷硫鈉 AR,92.5-100.5%

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒De-O-乙酰香蘭色烯鋅粒 SP十二烷硫鈉 97%,電泳

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒Ent-14,16-環(huán)氧-8-海松烯-3,15-二對(duì)氨苯乙 98%十二烷硫鈉 99.0%,超純級(jí)

血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Ent-3-氧代貝殼烯烷-16,17-二苯酰 98%十二烷硫鈉 ACS

血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 L-焦谷氨酯2,4-二氟溴苯 98%十二烷硫鈉 分子生物學(xué)級(jí),≥98.5% (GC)

血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒Momor-腦脂I2--6-氟苯 98%十二烷硫鈉 離子對(duì)色譜級(jí),≥99.0% (GC)

血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒N1,N10-雙(對(duì)香豆酰)亞精3,5-二氟苯 97%橙花   97%

末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 N-對(duì)反式香豆酰酪3-磺酰 97%丁位辛內(nèi)酯  98%

末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 N-反式-阿魏酰低聚糖-3-氧酪苯 99%3-苯 99%

補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒N-反式阿魏酰酪對(duì)叔丁苯  95%3-苯 ≥98%, FCC

補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒N-瓜馥木烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑,98%二亞砜 for HPLC, ≥99.7%

補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒 O-beta-D-吡喃葡萄糖對(duì)乙烯苯酯2,2,2-三氟乙 99.5% CP,98.0%
hnRNP K異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒細(xì)胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的橙色熒光探針進(jìn)行細(xì)胞膜染色。染色液I 進(jìn)入細(xì)胞膜后,在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。染色液I在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),被激發(fā)后可以發(fā)出橙色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。

染色液I 通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡(jiǎn)單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。

儲(chǔ)存條件:4℃避光保存。長(zhǎng)期保存-20℃避光保存。

有效期:六個(gè)月。



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